背景介绍:
测定时间-浓度杀菌曲线能够反映药物对微生物的杀菌效应和杀菌速度,可以为临床药物剂量和给药方案提供参考。该方法不但可以对单一药物进行准确测试,也可以对联合用药进行准确测试,但是该方法需要较长时间的监测和分析,操作较为繁琐。该方法一般结合生长曲线测量,先根据生长曲线谱挑取药物作用的最佳浓度和时长后再进行进一步准确计数换算。
常规实验流程:
1. 首先采用微量肉汤稀释法对受试菌进行测试药物的MIC及MBC测试,当MBC/MIC≤4时,认为该药物具有杀菌作用
2. 采用肉汤稀释法配制含有0.5MIC、1MIC、2MIC、4MIC、8MIC、16MIC、32MIC系列浓度的受试菌菌液,同时取一管未加测试药物的菌液作为生长对照,并对其进行菌落培养计数,记录为0h(t0)的菌落数
3. 将以上菌液进行振荡培养,并在特定时间点(如2、4、6、10、24h)对所有管取样,经过合适梯度稀释后涂布至不含测试药物的正常培养基平板培养过夜后,拍照计算菌落数量。
4. 以每毫升菌落形成单位的对数值为纵坐标,时间为横坐标绘制杀菌曲线。以t0点为抗菌药物加入受试菌菌液时间点,细菌存活数下降≥3 lgCFU/ml时,认为测试药物在该浓度下对受试菌有杀菌作用。
图片展示:
应用说明:
确定药物对微生物的杀菌效果及杀菌时间
确定联合用药的杀菌效果
参考文献:
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