背景介绍
cDNA 文库（Complementar DNA Library）是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 基因片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。cDNA 是便于克隆和大量表达，它不像基因组含有内含子而难于表达，因此可以从 cDNA 文库中筛选到所需的目的基因，并直接用于该目的基因的表达。
锐志魔方生物可提供cDNA文库构建以及酵母单杂交筛选和酵母双杂交筛选服务。
cDNA文库质量标准
1）库容 ≥ 1.0 × 107，
2）平均片段长度超过1Kb，且80%以上的片段长度超过1kb
cDNA文库构建服务流程
1) 总RNA提取；
2）mRNA纯化；
3）反转录合成cDNA第一链；
4）PCR扩增合成双链cDNA；
5）分级分离双链cDNA，去除小片段DNA；
6）双链cDNA的消化与连接。
酵母单杂交筛选服务流程
1）构建诱饵载体
2）自激活验证
3）两次重复筛库
4）筛选到的单克隆，进行PCR扩增测序
5）点对点验证
酵母双杂交筛选服务流程
1）构建诱饵载体
2）自激活验证
3）两次重复筛库
4）筛选到的单克隆，进行PCR扩增测序
5）点对点验证
技术优势：
1） 严格的建库质控标准
2） 丰富的筛库经验，专业人员分析诱饵蛋白结构
3） 严格执行两次重复筛库，降低人为和技术误差
4） 点对点验证筛库结果，避免假阳性