无菌检查

无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器械等是否无菌的方法，仅表明供试品在该检验条件下未发现微生物污染。

检查需在无菌条件下进行，试验环境符合要求，全过程严格无菌操作，防止再污染，且单向流空气区域等需定期监测洁净度，隔离系统定期验证。 培养基 包括硫乙醇酸盐流体培养基（用于厌氧菌和需氧菌培养）、胰酪大豆胨液体培养基（用于真菌和需氧菌培养），以及中和或灭活用培养基、0.5% 葡萄糖肉汤培养基等多种。

培养基需按处方制备，经灭菌处理，保存有条件限制。 培养基需进行适用性检查，包括无菌性检查（每批取不少于 5 支，培养 14 天无菌生长）和灵敏度检查（用特定菌株，传代不超 5 代，制成菌悬液接种，空白对照无菌，试验菌生长良好则合格）。 稀释液、冲洗液及其制备 配制后需灭菌，常用 0.1% 无菌蛋白胨水溶液、pH 7.0 无菌氯化钠 蛋白胨缓冲液等，也可选用其他适宜溶液，必要时加表面活性剂或中和剂。

方法适用性试验 用于确认检查方法适合供试品，检验程序或产品变化可能影响结果时需重新试验。对每种试验菌逐一确认，采用薄膜过滤法或直接接种法，与对照管比较，若试验菌生长良好则方法适用，否则需消除抑菌作用后重试，也可与供试品无菌检查同时进行。

供试品的无菌检查 包括薄膜过滤法和直接接种法（优先用薄膜过滤法），方法和条件与适用性试验一致。需规定检验数量和检验量，设置阳性对照（选对应菌株，加菌量不超 100cfu，生长良好）和阴性对照（无菌生长）。 供试品处理及接种培养基需无菌操作，不同类型供试品（水溶性液体、固体、非水溶性、气雾剂等）处理方法不同。接种后培养基按规定温度培养不少于 14 天（生物制品培养有特殊要求），期间观察是否有菌生长，必要时进一步检查。

结果判断 供试品管均澄清或确证无菌生长，判符合规定；任一管显浑浊且确证有菌生长，判不符合规定，除非试验无效（满足特定条件）。试验无效需重试，重试无菌生长判符合规定，有菌生长判不符合规定。