真菌过表达株构建
真菌过表达株是重组蛋白生产、代谢工程与基因功能增强研究的关键工具。锐志魔方利用电转化、原生质体转化及根癌农杆菌介导转化（ATMT）等技术，为酵母型真菌、丝状真菌和大型真菌提供稳定可靠的过表达株构建服务。
一、表达系统选择
- 游离型表达：2 μm / ARS 自主复制质粒，拷贝数高，适合快速表达与筛选；
- 整合型表达：表达盒定点整合至 rDNA、 HIS3、TRP1 等中性位点，遗传稳定，适合发酵生产；
- 诱导型表达：采用 AOX1、GAL1、glaA 等诱导型启动子，实现目标蛋白的可控表达。
二、过表达表型验证示例
三、可承接真菌类群
| 分类 | 可承接真菌 |
|---|---|
| 酵母型真菌 | 毕赤酵母、酿酒酵母、白念珠菌、隐球菌、阿萨希毛孢子菌、马尔尼菲蓝状菌 |
| 丝状真菌 | 曲霉属、青霉属、镰刀菌、植物炭疽菌 |
| 大型真菌 | 香菇、双孢蘑菇、金针菇等 |
| 其他 | 具体可咨询定制 |
四、交付内容
- 重组表达载体构建报告；
- 表达水平验证（qPCR / Western / 荧光）；
- 阳性克隆甘油菌与实验报告。
五、参考文献
- Rybak J M, Fortwendel J R, Rogers P D. Emerging threat of triazole-resistant Aspergillus fumigatus. Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 2019, 74(4): 835-842.
- Bischof R H, Horejs J, Metz B, et al. L-Methionine repressible promoters for tuneable gene expression in Trichoderma reesei. Microbial Cell Factories, 2015, 14(1): 1-11.
- 吕亚萍. 白念珠菌 ERG4 基因突变/高表达与唑类药物耐药的关系. 山西医科大学, 2015.
- 闫佩瑶, 张莉, 王明玉, 等. PEG 介导的假禾谷镰孢菌 GFP 遗传转化体系的建立. 山东农业科学, 2021.