基因编辑价目与优惠

Cas9 RNP + 同源臂精准编辑 · 真菌 / 酵母 / 食用菌 · 分转化部分满五送一

Cas9 RNP + 同源臂 · 精准基因编辑服务

面向真菌 / 酵母 / 食用菌的物种级编辑方案,避开宿主启动子识别差异、显著降低脱靶,在 100+ 种微生物底盘上稳定交付基因型明确的敲除、点突变与标签插入突变株。

我们用 Cas9 RNP 体外预组装加同源臂供体 DNA 的方式做编辑——转化后以抗性标记正向筛选并多轮纯化,在 100+ 种微生物底盘上稳定交付基因型明确的敲除、点突变与标签插入突变株。整体交付周期 1 ~ 4 个月,视底盘难度与位点数量而定。

2026 秋季限时促销 · 分转化部分满五送一
编辑机制RNP 切割 + 同源重组修复
底盘覆盖酵母 / 霉菌 / 食用菌 / 病原
支持改造敲除 · CRISPR down · 过表达
典型交付周期1 ~ 4 个月
保密项目材料、菌株信息双盲

标准工艺 · RNP + 同源臂

传统 CRISPR 编辑常常受困于宿主 NHEJ 效率、转化效率低、重组子纯度不足三个瓶颈。我们把 Cas9 蛋白和 gRNA 在体外预先组装成 RNP,与携带 50–1000 bp 同源臂的供体 DNA 一起送进细胞,转化后以抗性标记正向筛选、多轮单克隆纯化,最终交付基因型明确、无杂菌污染的突变株。

体外 RNP

Cas9 蛋白 + 高纯度 sgRNA 体外 37℃ 孵育 15 min 形成活性复合物,避开宿主启动子识别差异,剂量可控、瞬时作用、零整合风险。

同源臂供体

供体 DNA 携带 50–1000 bp 同源臂,单链/双链按底盘选择;用于基因敲除、点突变、标签插入与定点整合,序列可在合同里完整披露。

感受态适配

针对每个底盘预设感受态制备方案——酵母 LiAc/SS-carrier、毕赤酶解+LiAc、念珠菌电转、丝状真菌原生质体 PEG/电转、食用菌农杆菌 ATMT 备援。

抗性筛选 · 纯化保真

转化后以抗生素抗性标记做正向筛选,配合多轮单克隆/单孢分离纯化,PCR 与 Sanger 测序双重验证,杜绝杂菌与异核体残留,交付菌株纯度可控、便于工业放大。

对丝状真菌我们仍保留 ATMT、PEG-原生质体与电转三套备援方案,对 NHEJ 效率偏低的菌株(如部分念珠菌、新型曲霉)会通过 RNP 表达时长、同源臂 GC 调整或加损伤诱导策略做补偿。

服务价目

以下为常见菌株在三种改造类型下的单基因转化费用(人民币),已包含 RNP 制备、同源臂供体、抗性标记筛选、多轮纯化与 PCR/测序验证等"把改造做进菌株"的全流程转化工序。分离株及特殊菌株的报价见下方"分离株专区"。

费用说明
本表价目仅含转化费用。如需我们先构建携带筛选标记、同源臂或标签的载体/敲除盒/过表达盒,按元件数 1,500 ~ 4,800 元/件 另行计费(含引物合成、PCR、克隆与 Sanger 验证),不包含在上述转化费内。分离株专区内的"载体构建费用另算"说明同样适用。

酵母类

覆盖工业酵母、非常规酵母、念珠菌、隐球菌、汉逊酵母等常规底盘。

常见菌株(按表价执行)
中文名拉丁学名基因敲除致死 CRISPR down过表达
克鲁维酵母属马克思克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus¥19,800¥15,600¥12,600
乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis¥19,800¥15,600¥12,600
念珠菌属热带念珠菌Candida tropicalis¥19,800¥15,600¥12,600
白色念珠菌Candida albicans¥19,800¥15,600¥12,600
近平滑念珠菌Candida parapsilosis¥19,800¥15,600¥12,600
产朊假丝酵母Candida utilis¥19,800¥15,600¥12,600
中间假丝酵母Candida intermedia¥19,800¥15,600¥12,600
其他念珠菌Candida spp.¥19,800 起¥15,600 起¥12,600 起
耶氏酵母属解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica¥19,800¥15,600¥12,600
隐球菌属新生隐球菌Cryptococcus neoformans¥19,800¥15,600¥12,600
浅白隐球菌Cryptococcus gattii¥19,800¥15,600¥12,600
汉逊酵母属汉逊酵母Ogataea polymorpha¥19,800¥15,600¥12,600
接合酵母属鲁氏酵母Zygosaccharomyces rouxii¥19,800¥15,600¥12,600
酿酒酵母属酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae¥9,600¥9,600¥4,800
毕赤酵母属毕赤酵母Komagataella phaffii¥9,600¥9,600¥4,800
注意
念珠菌属多为二倍体,对双等位编辑需双轮转化,同一基因双拷贝的合计费用按 2 个基因位点计算,可享满五送一。

丝状真菌 · 霉菌

覆盖红曲霉、青霉、曲霉、木霉等工业丝状真菌,覆盖 ATMT、原生质体 PEG、电转三种转化路线。

常见菌株(按表价执行)
中文名拉丁学名基因敲除致死 CRISPR down过表达
红曲霉属红曲霉Monascus ruber¥23,400¥18,600¥15,600
紫红曲霉Monascus purpureus¥23,400¥18,600¥15,600
曲霉属构巢曲霉Aspergillus nidulans¥19,800¥16,200¥13,200
土曲霉Aspergillus terreus¥23,400¥18,600¥15,600
烟曲霉Aspergillus fumigatus¥23,400¥18,600¥15,600
黑曲霉Aspergillus niger¥19,800¥16,200¥13,200
黄曲霉Aspergillus flavus¥23,400¥18,600¥15,600
青霉属产黄青霉Penicillium chrysogenum¥19,800¥16,200¥13,200
绳状青霉Penicillium funiculosum¥19,800¥16,200¥13,200
扩展青霉Penicillium expansum¥19,800¥16,200¥13,200
二指青霉Penicillium digitatum¥19,800¥16,200¥13,200
抱青霉Penicillium nalgiovense¥19,800¥16,200¥13,200
杂色曲霉Aspergillus versicolor¥23,400¥18,600¥15,600
木霉属深绿木霉Trichoderma atroviride¥21,600¥17,400¥14,400
长枝木霉Trichoderma longibrachiatum¥21,600¥17,400¥14,400
哈茨木霉Trichoderma harzianum¥23,400¥18,600¥15,600
里氏木霉Trichoderma reesei¥21,600¥17,400¥14,400

食用菌 · 病原菌 · 其他

食用菌默认走农杆菌 ATMT 路线,临床/田间病原菌按 BSL-1/2 标准操作。

常见菌株(按表价执行)
类群中文名拉丁学名基因敲除致死 CRISPR down过表达
植物病原菌植物炭疽Colletotrichum gloeosporioides¥23,400¥18,600¥15,600
番石榴Colletotrichum acutatum¥23,400¥18,600¥15,600
拟茎点霉菌Phomopsis capsici¥23,400¥18,600¥15,600
稻瘟病菌Magnaporthe oryzae¥23,400¥18,600¥15,600
镰刀菌Fusarium graminearum¥23,400¥18,600¥15,600
稻曲病菌Ustilaginoidea virens¥19,800¥16,200¥13,200
其他植物病原菌Phytopathogen (on request)¥21,600 ~ ¥36,000¥17,400 ~ ¥28,800¥14,400 ~ ¥24,000
盖氏菌属红色毛癣菌Trichophyton rubrum¥23,400¥18,600¥15,600
阿萨希毛孢子菌Trichosporon asahii¥23,400¥18,600¥15,600
马尔尼菲蓝状菌Talaromyces marneffei¥23,400¥18,600¥15,600
其他菌丝状菌Filamentous fungi (on request)¥23,400¥18,600¥15,600
白僵菌属球孢白僵菌Beauveria bassiana¥23,400¥18,600¥15,600
子实体型真菌金针菇Flammulina velutipes¥25,200¥20,400¥16,800
双孢菇Agaricus bisporus¥25,200¥20,400¥16,800
香菇Lentinula edodes¥25,200¥20,400¥16,800
灵芝Ganoderma lucidum¥25,200¥20,400¥16,800
蛹虫草Cordyceps militaris¥26,100¥21,000¥17,400
其他酵母型如扣囊酵母、圆红冬孢酵母等on request¥9,600 起¥9,600 起¥4,800 起

分离株专区 首基因 +30%

客户从临床、环境、土壤、植物、发酵液等分离获得的野生型菌株,需要先做菌种确认、生理条件摸索、Cas9 灵敏度测试与转化体系重建,首个基因位点加收 30%(含体系建立费),自第二个位点起按对应常见菌株参考价执行。

类群名称拉丁学名基因敲除(首基因)致死 CRISPR down(首基因)过表达(首基因)
念珠菌属耳念珠菌(BSL-2)分离Candida auris¥25,800¥20,300¥16,400
念珠菌属其他假丝酵母 分离Candida spp.¥25,800 起¥20,300 起¥16,400 起
曲霉属其他曲霉 分离Aspergillus spp.¥28,100 起¥22,700 起¥18,800 起
木霉属其他木霉 分离Trichoderma spp.¥28,100 起¥22,700 起¥18,800 起
植物病原菌其他植物病原菌 分离Phytopathogens¥28,100 起¥22,700 起¥18,800 起
菌丝状菌其他菌丝状菌 分离Filamentous fungi¥28,100 起¥22,700 起¥18,800 起
子实体型真菌其他食用菌 分离Macrofungi¥32,800 起¥26,500 起¥21,900 起
说明 · "首基因 +30%"指项目内同一分离株的第一个改造位点(含基因敲除/CRISPR down/过表达任一类型)的费用加收 30%,用于覆盖菌种鉴定、Cas9 灵敏度滴定、阳性克隆 PCR/Southern 复筛等额外工作量。从第二个位点起,按对应的常见菌株参考价目执行。载体构建费用另算(按元件数 1,500 ~ 4,800 元/件,含引物合成、PCR、克隆、Sanger 测序验证)。

夏季限时 · 分转化部分满五送一

同一项目内"分转化部分"费用(即按每个基因位点独立计费的转化、筛选、验证等工序)每累计 5 个位点,送 1 个免费位点(按价目表对应类型的中位价计),可与分离株加价叠加使用。

5 + 1
送一优惠位点

真菌转座子随机突变体库构建

除定点编辑外,我们同时承接真菌的转座子随机突变体库构建:利用 AC/Ds 或 PiggyBac(PB)转座子系统在基因组上产生大容量、近随机的插入突变,用于功能基因筛选、必需基因鉴定与表型组学。我们采用转座子介导的插入,而非依赖农杆菌 T-DNA 插入体系——规避 T-DNA 偏好性整合、多拷贝串联与边界删除等问题,插入更趋随机、背景更干净。适用底盘覆盖酵母、丝状真菌与食用菌。

AC/Ds 转座系统

源于玉米的天然双元件转座子,Ds 元件在 Ac 转座酶驱动下于非同源位点随机切接,产生稳定单拷贝插入,适合构建覆盖度可控的插入突变库。

PiggyBac(PB)

TTAA 靶点、可精确切除/再插入的万能转座子,转座效率高、插入位点近随机,是真菌功能基因组学大规模突变体库的主流选择之一。

非 T-DNA 插入

采用转座子介导的随机插入,不依赖农杆菌 T-DNA 插入。相比 T-DNA,插入谱更均匀、单拷贝比例更高,更适合大规模正向遗传筛选。

位点鉴定与验证

突变体库配 splinkerette PCR/半随机 PCR 与高通量测序(Tn-seq)定位插入位点,交付代表性克隆的 Sanger 验证,确保突变谱与覆盖度可信。

与定点编辑互补

定点编辑(RNP + 同源臂)解决"我想精准改哪个基因",转座子随机突变库解决"哪些基因与某表型相关"。两种策略可组合:先用转座子库做正向遗传筛选锁定候选基因,再用 RNP 做精准回补与验证。

AC/Ds · PB
转座子随机插入 · 非 T-DNA

服务流程

从询价到交付的全过程,文档和菌株双线并行,所有节点双方留痕。标准项目自材料齐备起 1 ~ 4 个月交付,具体周期在评估阶段随报价一并确认。

1

项目评估

1-2 工作日。菌株背景确认、靶基因序列评估、RNP 切割位点预筛。

2

合同与材料

签订保密协议 + 服务合同;客户寄送菌株、质粒(如有)或提供序列。

3

RNP 编辑

体外组装 RNP + 同源臂共转化,抗性标记正向筛选、多轮单克隆/单孢纯化与复筛。

4

交付

突变体甘油管 2 支、PCR 与 Sanger(必要时 NGS)验证报告、原始数据与序列比对图。

典型应用场景

从代谢工程底盘改造到致病机制研究,覆盖工业、教育、医疗、农业等下游用途。

工业菌株迭代

提升酿酒酵母、毕赤、里氏木霉的生产强度,去除副产物通路,构建稳定的工业级底盘。

致病机制研究

在烟曲霉、新生隐球菌、白色念珠菌等病原菌中精准敲除毒力基因,研究宿主-病原互作。

食用菌育种

金针菇、香菇、灵芝、蛹虫草等品种改造,纤维降解、抗逆、活性成分相关通路定向编辑。

把你的菌株和靶基因告诉我们,48 小时内给方案

提供菌株背景、目标改造类型与位点数量,我们即给出报价、周期与可行性判断。所有项目材料双盲处理。