细菌转座子突变体文库构建
转座子随机插入突变体库是解析细菌全基因组功能的经典工具。锐志魔方基于 Himar1 等 mariner 家族转座元件,为革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌及支原体构建覆盖度高、随机性好的单基因突变体库。
技术原理
我们的技术优势
- 高随机性:采用 Himar1 转座酶,催化 TA 双核苷酸位点单拷贝插入,覆盖全基因组。
- 多物种适配:已建立大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、弧菌、巴氏杆菌等多种细菌的建库体系。
- 一站式交付:从质粒构建、电转化/接合转移、文库扩增到后续 Cubes-seq 插入位点鉴定。
- 文库可复用:同一次构建的突变体库可多次用于不同表型筛选,显著降低科研成本。
应用方向
- 必需基因 / 非必需基因全局注释
- 致病性、耐药性、生物膜形成相关基因筛选
- 代谢通路、营养利用、环境胁迫响应机制研究
- 疫苗候选抗原与药物靶点发掘